Digital Gene Expression
現在のお客様やこれから製品のご購入を予定されているお客さまからのご要望をもとに、Digital Gene Expression をサポートする最初の手法として mRNA-seq を選択しました。
実装されている mRNA-seq 法で利用している統計手法は Mortazavi A らにより "Mapping and quantifying mammalian transcriptomes by RNA-Seq", Nat Methods. 2008 Jul;5(7):585-7として発表されています。このモデルのひとつの利点は、統計量に RPKM(Reads Per Kilobase exon Model per million mapped reads)を用いていることです。これによりデジタル遺伝子発現を利用する際、遺伝子発現レベルを正規化することが容易になります。
CLC Genomics Workbench での mRNA-seq のワークフローは以下のようになります。
- すべてのリードは染色体上の既知遺伝子にマッピングされます。まず最初に遺伝子にユニークにマッピンされたリードがすべてカウントされます。それ以外のユニークにマッチしなかったリードは比率に応じて遺伝子に分配されます。
- RPKM については Exon にマッピングされたリードのみが興味の対象となります。RPKM 値はある実験における Exon の全長とマッチした数に基づいて正規化され、それにより異なる実験間での比較が可能となっています。
- CLC Genomics Workbench で採用されている一般的な遺伝子発現機能を利用して、mRNA-seq 実験をマイクロアレイの結果と比較することで mRNA-seq の実験を評価することが可能です。
新しい転写産物変異の発見
実装されているアノテーション機能
ユーザーマニュアルに Digital Gene Expression に関する詳細についてはユーザーマニュアルの以下に記載があります。 RNA-Seq analysis Expression profiling by tags




